目的 分析局部放射治疗(LT)在经酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后出现寡残留病灶的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的临床价值。方法 回顾性纳入2018年2月至2024年5月在北京协和医院接受靶向治疗并发展为寡残留病变的61例Ⅳ期NSCLC患者,将其分成局部放射治疗组(n=31,应用局部巩固治疗或局部消融治疗,期间继续全身治疗)和非局部放射治疗组(n=30,仅应用全身治疗)。比较两组无进展生存期(PFS)、总生存期(QS)及局部放射治疗组安全性。结果 局部放射治疗组较非局部放射治疗组改善无进展生存期(31个月比23个月,P=0.171),但未达到统计学差异。接受局部放射治疗的患者总生存期更长(54个月比42个月,P=0.713),但未达到统计学差异。同时局部放射治疗组共7例患者(22.6%)发生任何级别的放射性肺炎,其中4例(12.9%)发生1级肺炎,3例(9.7%)发生2级肺炎。单因素及多因素分析显示转移灶数目、性别、ECOG评分、TKI类型以及靶向治疗获得的最佳疗效可以影响患者预后,其中ECOG评分和吸烟状态是PFS的独立影响因素。结论 经TKI治疗后出现寡残留病灶的NSCLC患者中,应用局部放射治疗初步显示可能延长PFS,且未显著增加不良反应。

目的 解决硅肺研究领域多组学数据分散、整合分析不足的瓶颈,构建一个综合性数据平台,以支持纤维化肺组织中的多层次分子变化的系统解析与治疗靶点的快速挖掘。方法 系统整合人类和小鼠硅肺及对照肺组织的转录组、单细胞转录组、定量蛋白质组、修饰特异性蛋白质组和代谢组学数据,集成DESeq2、Seurat、CellChat等生物信息学工具,开发基于Web的可视化分析平台,实现数据可视化和交互分析功能。结果 构建了一个综合性的硅肺病多组学数据平台SilicosisOmics (https://respir.pumc.edu.cn/SilicosisOmics/#/)。该数据平台整合了来自硅肺病肺组织以及非病变肺组织的五种类型组学数据,涵盖人类和小鼠两个物种。SilicosisOmics不仅提供在线搜索以静态展示基因表达或单细胞聚类等信息,还提供交互式分析工具,支持用户执行差异基因表达、通路富集和细胞间相互作用等个性化分析。结论 SilicosisOmics平台为硅肺病及肺纤维化研究提供了系统的多组学数据资源与分析工具,有助于推动疾病机制研究、靶点发现及后续转化研究的发展。

目的 筛选可溶性表达且具有血凝活性的流感毒株的B/Victoria系血凝素(HA)重组蛋白。方法 以B/Darwin/7/2019(B/Victoria)毒株为基础,在HA胞外区C端分别融合亮氨酸拉链GCN4pII和GCN4pLL三聚化基序(T1和T2)、T4噬菌体Foldon的三聚化基序(T3)。获得HA突变体基因BV-T1、BV-T2和BV-T3,同时构建HA胞外区突变体基因BV-ecto作对照组,插入pFastBac1载体,利用杆状病毒-Sf9细胞表达体系,表达HA突变体蛋白,收获感染细胞培养上清。采用Strep-Tactin亲和层析纯化,对HA突变体纯化蛋白的寡聚化和血凝活性进行鉴定。结果 4种HA突变体蛋白均在上清中获得可溶性表达;BV-T2和BV-T3的三聚化程度很高,BV-T1以三聚化为主,存在少量的低聚化, BV-ecto以单体存在;BV-T1和BV-T2有血凝活性,而BV-T3和BV-ecto无血凝活性。结论 可溶性表达的BV-T2 HA突变体蛋白三聚化程度好,且具有血凝活性。亮氨酸拉链三聚化基序GCN4pLL可用于B/Victoria系HA重组蛋白的可溶性表达,为可溶性B/Victoria系HA重组蛋白疫苗的研发提供参考。

在老龄化社会背景下,老年肿瘤患者的数量不断增加。老年肿瘤学近年来得到了广泛关注。根据老年人健康状态进行个体化的诊断、治疗、随诊以及护理变得越来越重要,因此,必须要强调对患者进行老年综合评估(CGA),包括老年人的躯体机能、营养状况、认知功能、情绪状态、共病情况、多重用药、社会状况以及诊疗意愿等。本文针对老年肿瘤治疗相关的老年综合评估提出共识建议,为国内的临床实践提供参考。

目的 构建多状态马尔科夫模型探讨中国系统性红斑狼疮(SLE)患者器官损伤累积的动态模式,探索不同疾病阶段器官损伤进展的可能影响因素,为优化临床治疗策略和卫生经济学评价提供依据。方法 利用中国系统性红斑狼疮研究协作组多中心注册队列(CSTAR)中满足本研究纳入标准的SLE患者作为研究对象。基于系统性红斑狼疮国际合作组/美国风湿病学会损伤指数(SDI)将SLE划分五个不可逆状态(SDI=0、1、2、≥3及死亡),分别用S0,S1,S2,S3和Death表示。利用SLE患者不同时点的诊疗数据,利用R语言“mstate”包构建多状态马尔科夫模型。结果 本研究纳入23 926例SLE患者,累计随访122 030次。基线SLE患者中20 892例患者无任何器官损伤,在随访期间内,不同器官损伤累积状态下的转移概率分别为7.01%(S0→S1), 12.58%(S1→S2), 10.64%(S2→S3)和12.19%(S3→Death)。多状态模型显示:年龄、性别、病程、平均疾病活动性指数(SLEDAI)评分、激素使用剂量、重要脏器受累情况均与器官损伤状态转移相关。不同状态间转移时年龄每增1岁,SLE患者器官损伤累积风险增加2-3%(P＜0.01);神经系统受累(S0→S1:HR=1.34;S1→S2:HR=1.53;S2→S3:HR=1.73)、心肺系统受累(S0→S1:HR=3.66;S1→S2:HR=1.51;S2→S3:HR=1.52)、肾脏受累(S0→S1:HR=1.24)和血液系统受累(S0→S1:HR=1.24)可能会加速器官损伤累积。结论 SLE患者器官损伤累积的转移概率随着时间的推移逐渐增高,在疾病早期阶段尽可能减少重要脏器的受累,不同治疗阶段需动态调整治疗策略。

目的 针对NKG2A-HLA-E负调控通路,构建诱导多能干细胞(iPSC)来源的基因工程NKG2A敲除的NK细胞(NKG2A KO-iNK),在体外初步评价其肿瘤杀伤功能。方法 利用基因编辑技术在iPSC中敲除NKG2A,将其在体外诱导分化为NKG2A KO-iNK细胞,并在不同分化阶段利用流式细胞测量术检测特异性的表面标志物;利用Western blot验证NKG2A KO-iNK细胞NKG2A的敲除情况,并用流式细胞测量术检测NKG2A KO-iNK细胞常见的NK细胞活化性受体及天然细胞毒性受体的表达水平;乳酸脱氢酶检测法(LDH)检测NKG2A KO-iNK细胞对不同人白细胞抗原E(HLA-E)表达水平肿瘤细胞的体外细胞毒活性。结果 将Cas9蛋白和靶向编码NKG2A的KLRC1基因第1、2外显子的3条向导RNA(sgRNA)共转染iPSC对其进行基因敲除,测序结果显示成功获得在第1外显子插入1个T碱基的单克隆NKG2A敲除的iPSC(NKG2A KO-iPSC)。iPSC向NK细胞诱导分化的过程中,第8天类胚体(EBs)阶段检测 CD34表达水平在30%～50%;第28天NK诱导分化阶段CD56和CD16的表达均达80%以上。Western blot结果显示,NKG2A KO-iNK细胞NKG2A被成功敲除;流式结果显示NKG2A KO-iNK细胞活化性受体NKG2D及细胞毒性受体NKp30、NKp44、NKp46的表达水平和野生型iNK(WT-iNK)细胞基本一致。LDH实验结果显示,NKG2A KO-iNK细胞对HLA-E高表达的B细胞前体白血病细胞系Nalm6的细胞毒活性显著高于WT-iNK细胞,而对HLA-E低表达的人骨髓瘤细胞系H929和HLA-E几乎不表达的人肝癌细胞系HepG2,NKH2A KO-iNK细胞和WT-iNK细胞两者之间的细胞毒活性差异无统计学意义;γ干扰素(IFN-γ)处理能显著上调Nalm6细胞的HLA-E表达水平,进而进一步增强NKG2A KO-iNK细胞对Nalm6细胞的细胞毒活性。结论 由于阻断了NKG2A-HLA-E负调控通路,基因工程NKG2A KO-iNK细胞对HLA-E高表达的肿瘤细胞系在体外显示出明显增强的细胞毒活性,提示其作为一种新型细胞治疗的可能性,为肿瘤的细胞过继免疫治疗提供一种新的思路。

目的 基于人多能干细胞(hPSCs)衍生的肝细胞样类器官(HLO)构建良好的人类肝脏再生的体外研究模型。方法 逐级诱导分化得到hPSCs衍生的HLO,通过定点在HLO培养条件中添加或撤离对乙酰氨基酚(APAP)模拟急性肝损伤,构建基于HLO的肝损伤后再生模型。随后,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建调控肝再生的关键基因连环蛋白/钙粘蛋白相关蛋白β1基因CTNNB1敲除的HLO,并进行APAP损伤再生实验。通过形态学观察、RT-qPCR、Western blot以及病理学分析进一步评估HLO作为肝再生研究模型的可用性。结果 通过形态学观察以及标记基因的表达量检测,结果显示hPSCs衍生的HLO在APAP药物处理后能启动其损伤后的再生反应,并且,CTNNB1缺失的HLO相比对照组HLO,在损伤后再生过程中其尺寸恢复延迟、相关基因表达量下调或延后表达。结论 本研究构建了一种基于hPSCs衍生的HLO人类肝脏再生模型,该模型可能成为开展肝再生过程中基因功能研究的工具。

目的　构建人结直肠癌类器官并进行化疗药物药效评估。方法　利用体外分离的人结直肠癌组织,采用3D类器官培养方法建立生物样结肠癌3D培养物;并使用免疫组化方法对肿瘤类器官和原发肿瘤组织进行结直肠癌分子标记物染色;使用肿瘤类器官进行药物敏感性试验,分别给予不同浓度化疗药物5-氟尿嘧啶、奥沙利铂、伊立替康;采用3D细胞活力检测法测定药物处理前后的类器官活性。结果　成功建立了5例患者样本来源的结直肠癌类器官;免疫组化结果显示CK20、Ki67和Villin蛋白的表达在肿瘤类器官与原发肿瘤中相似,且肿瘤类器官保留了与原发肿瘤相似的组织学特征;不同患者来源的肿瘤类器官表现出对不同化疗药物差异的敏感性。结论　人结直肠癌类器官模型可以反应对不同化疗药物的不同敏感性,可为指导临床制订患者的个性化治疗提供参考。

目的 验证骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)缓解免疫衰老的作用,探究其衰老改善的主要免疫细胞群体。方法 分离获得小鼠脾淋巴细胞,刺激增殖7d构建复制性衰老细胞模型。利用流式细胞测量术检测年轻对照组、复制性衰老对照组和BM-MSCs共培养组T细胞亚群衰老标志物p16ink4a(p16)和p21cip1(p21)的表达水平。结果 T淋巴细胞复制性衰老模型中观察到持续增殖后 CD8⁺T细胞较CD4⁺T细胞衰老显著,在CD8⁺T细胞的初始细胞、效应细胞亚群中,效应细胞衰老最显著;BM-MSCs共培养对衰老的效应细胞没有明显影响,主要通过延缓初始T细胞的衰老,达到缓解CD8⁺T细胞衰老的作用(P＜0.01,P＜0.001)。结论 与BM-MSCs共培养可以缓解T细胞的复制性衰老表型,对CD8⁺T细胞的抗衰作用更显著,主要通过抑制初始T细胞的衰老实现。

颅咽管瘤是发生于儿童鞍区的少见良性肿瘤,术后患者可长期存活。因肿瘤及手术常损害下丘脑和垂体功能,导致下丘脑综合征、垂体前叶功能减退症、肥胖、电解质紊乱等一系列功能异常,需内分泌科为主的多学科团队进行长期的精细的激素治疗和随访管理。本共识针对此类人群,围绕围手术期管理、肥胖管理、激素替代、身高增长和青春发育等主题,制定规范化的长期随访管理建议,以提高临床医生的应对水平和患者的健康状态。