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2012年 第32卷 第9期    刊出日期：2012-09-05

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研究论文

HIV-p24核酸适配体的筛选

张宁 毛爱红 马瑾 廖世奇 张丽琼 王晓清 马君

2012, 32(9):  987-991. 

摘要 ( 1508 )   PDF (616KB) ( 847 )  

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摘 要：目的 利用SELEX技术筛选HIV-p24的核酸适配体，为艾滋病的诊断和治疗奠定基础。方法 以重组p24为筛选靶，用SELEX技术从随机寡核苷酸库中筛选与HIV-p24结合的寡核苷酸，利用凝胶阻滞实验鉴定第12轮筛选到的寡核苷酸与HIV-p24的结合，再用Dot-blot法筛选出与HIV-p24结合的核酸适配体，并检测核酸适配体识别HIV-p24的特异性。结果 Dot-blot筛选到5条与HIV-p24有较强结合能力的核酸适配体，且均为不同的序列。特异性检测显示，18和26号配体只与HIV-p24特异性结合，与人血清白蛋白、牛血清白蛋白和脱脂奶粉均无明显结合。结论 成功筛选到2条特异结合HIV-p24的核酸适配体，为其应用于艾滋病诊断和治疗提供了实验基础。

EGFP-线粒体蛋白导入载体的构建及功能验证

乔录新 张玉林 丁渭 陈德喜

2012, 32(9):  992-997. 

摘要 ( 1473 )   PDF (1154KB) ( 786 )  

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目的 构建能够将外源蛋白导入真核细胞线粒体的真核表达载体，并且通过增强型绿色荧光蛋白的表达进行示踪。方法 利用多重PCR扩增法将线粒体导肽序列与EGFP序列融合在一起，并插入真核表达载体pcDNA3.1，构建成真核表达载体pcDNA5.1-EGFP。将p53基因分别插入pcDNA5.1-EGFP和pcDNA3.1构建成pCDNA5.1-p53和pcDNA3.1-p53载体。经酶切和测序验证后在脂质体介导下分别将上述载体转染293T细胞，一方面在荧光显微镜下比较绿色荧光蛋白与细胞色素C在细胞内的分布情况，另一方面通过免疫荧光法比较p53蛋白在细胞内的定位。结果 绿色荧光的表达分布与细胞色素C具有一致性，且转染pcDNA5.1-p53载体的细胞内p53蛋白集中在胞浆线粒体中，而转染pcDNA3.1-p53载体的细胞内p53蛋白主要分布在细胞核内。结论 成功构建能够将外源蛋白导入线粒体的真核表达载体。

人羊膜上皮细胞在大鼠受损肝组织中分化为肝细胞

宫黎明 方宁 陈代雄 万卫红 章涛 余丽梅 赵春华

2012, 32(9):  998-1003. 

摘要 ( 1499 )   PDF (1876KB) ( 668 )  

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摘要：目的 探讨人羊膜上皮细胞在大鼠损伤肝原位植活及向肝细胞分化。方法 采用胰蛋白酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜上皮细胞（hAECs），采用流式细胞术和免疫荧光染色进行表型分析和细胞鉴定。采用腹腔注射D-氨基半乳糖建立大鼠肝损伤模型，随机分为hAECs移植组和对照组，每组20只。造模后24h用微量注射器于肝左、中、右叶3点分别移植L-DMEM 悬浮的hAECs悬液50μL（约1×106个细胞），对照组注射等量L-DMEM。于移植后48h、1周、2周和4周处死各实验组5只大鼠，取肝脏制备冰冻切片，采用免疫荧光双染色检查hAECs在受损肝原位的植活、分布及其向肝细胞分化的标志物表达。结果：⑴ FCM分析和免疫荧光染色结果显示，所分离的hAECs表达CD29、CD166及CK19，几乎不表达CD44、CD80、CD86、HLA-DR及波形蛋白；⑵ 免疫荧光双染色结果显示，hAECs移植后1周主要定植于肝小叶且表达AFP，至2周表达CK18，至4周表达Alb。结论：hAECs在大鼠受损肝组织中能被植活且可分化为肝细胞，提示hAECs移植在临床肝病的治疗方面可能具有潜在应用价值。

PI3K/Akt信号通路上调急性肺损伤大鼠肺泡上皮钠通道表达

邓旺 王导新 邓嘉 朱涛

2012, 32(9):  1004-1008. 

摘要 ( 1205 )   PDF (842KB) ( 607 )  

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摘要：目的 探讨PI3K/Akt信号通路对急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡上皮钠通道（ENaC）表达的影响。方法 健康成年SD大鼠随机分为对照组、ALI组（LPS）、治疗组（LPS+胰岛素）、干预组（LPS+胰岛素+渥曼青霉素），每组5只。观察肺组织病理学改变，收集支气管肺泡灌洗液（BALF），测量总肺水含量，RT-PCR法测定ENaC mRNA表达以及Western blot法测定ENaC蛋白和p-Akt表达。结果 治疗组BALF蛋白含量、髓过氧化物酶（MPO）活性、总肺水含量较ALI组显著减少（ｐ<0.05），干预组BALF蛋白含量、MPO活性、总肺水含量较治疗组显著增加（ｐ<0.05）。治疗组ENaC mRNA和蛋白表达及p-Akt较ALI组显著升高（ｐ<0.05）。干预组ENaC mRNA 和蛋白表达及p-Akt较治疗组显著降低（ｐ<0.05）。结论 激活PI3K/Akt通路通过上调ENaC表达，从而清除过多的肺水肿液。

小干扰RNA抑制L2RYC细胞MDR1表达及逆转对长春新碱的耐药性

何昀 刘东尧 温晟 李明勇 王强 华燚 魏光辉

2012, 32(9):  1009-1014. 

摘要 ( 1236 )   PDF (1587KB) ( 734 )  

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目的 研究携带多药耐药基因（MDR1）小干扰RNA（siMDR1）的真核表达质粒对L2RYC卵黄囊瘤细胞株中MDR1基因及蛋白表达的抑制效果，并观察siMDR1作用前后细胞对长春新碱（VCR）耐药性的变化。方法 设计4对特异性针对大鼠MDR1的siRNA序列，分别与pSES-HUS质粒重组获得pSES-siMDR1真核表达质粒，通过脂质体转染到L2RYC细胞中，用实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后MDR1 的mRNA及蛋白表达。转染后的细胞中再加入不同浓度的VCR，用MTT法检测吸光度，并计算出各组半数抑制浓度（IC50）值。结果 4对siMDR1分别转染均能不同程度地抑制L2RYC细胞MDR1基因表达，pool组MDR1的相对表达量最低为0.396±0.080，MDR1蛋白表达也能被有效抑制，经不同siMDR1转染的细胞加入VCR后细胞增殖被抑制，IC50降低，pool组最显著为1.632±0.423 mg/L，与其余各组比较有明显差异（P<0.05）。结论 pSES-siMDR1真核表达质粒能有效抑制MDR1基因和蛋白的表达，MDR1表达被抑制后L2RYC细胞对VCR的敏感性增加。

5-FU诱导人肝细胞癌MDR的比较蛋白质组学研究

韦艳 张海英 梁钢

2012, 32(9):  1015-1020. 

摘要 ( 1204 )   PDF (754KB) ( 741 )  

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摘要： 目的 寻找与人肝细胞癌多药耐药相关的蛋白质分子，为进一步研究人肝细胞癌多药耐药机制提供依据。方法 采用体外培养人肝癌细胞BEL-7402及其耐5-氟尿嘧啶（5-FU)细胞Bel-FU，MTT法检测Bel-FU的多药耐药性,采用双向凝胶电泳技术分析细胞BEL-7402与Bel-FU之间的差异表达蛋白，经MALDI-TOF/ TOF 质谱鉴定。Western-blot验证2-DE及质谱的检测结果。结果 与Bel-7402比较, Bel-FU中有24个蛋白表达上调，其中包括FAK、TM3、ORP150、CRT、NSE 、80K-H protein、EF-1-D、phosphoprotein等，12个蛋白表达下调。Western-blot法检测到蛋白FAK、CRT在Bel-FU中高表达，与2-DE结果一致。结论 通过建立人肝癌细胞BEL-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU的2-DE图谱筛选了多药耐药相关的差异蛋白，为人肝细胞癌MDR的分子机制研究奠定了基础。

大鼠脑出血后V1αR和AQP4表达升高与脑水肿的形成相关

张波 孙善全 甘胜伟 钟小燕 伍修宇 徐进 黄娟

2012, 32(9):  1021-1025. 

摘要 ( 1105 )   PDF (896KB) ( 628 )  

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目的 研究精氨酸加压素1α受体（V1αR）和水通道蛋白4（AQP4）在SD大鼠脑出血（ICH）脑组织中的表达变化及两者在脑水肿形成中的作用。方法 将自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型，分别于术后6、12、24和48h运用干湿重法、免疫荧光和Western blot检测脑含水量(BWC)、V1αR和AQP4蛋白的表达。结果 脑出血后6h，V1αR和AQP4的表达开始增加，至48h达到高峰分别为（21.88±0.44和23.16±0.67），显著高于假手术组（14.32±0.55和13.90±0.40）。与脑含水量呈正相关（P＜0.05）。结论 V1aR介导的AQP4表达升高是脑出血后脑水肿形成的主要原因。

血管钠肽促进小鼠3T3-L1脂肪细胞合成脂联素及其可能机制

铁茹 邢文娟 陈小丽 金坚 张海锋 于军 陈宝莹

2012, 32(9):  1026-1029. 

摘要 ( 1457 )   PDF (516KB) ( 696 )  

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目的 心房钠尿肽（ANP）除具有分解脂肪的功能，还可调节脂联素、瘦素等脂肪因子的水平。血管钠肽（VNP）是一种人工合成的钠尿肽，但其对脂肪因子的作用尚不清楚。本研究拟探讨VNP对脂肪因子脂联素生成的影响及其机制。方法 在3T3-L1细胞分化的脂肪细胞，加入不同摘要：目的 本研究拟探讨血管钠肽(VNP)对脂肪因子脂联素生成的影响及其机制。方法 在3T3-L1细胞分化的脂肪细胞，加入不同浓度的VNP，分别用实时定量PCR法和Western blot法检测脂联素的mRNA水平和蛋白表达，放免法测定细胞内cGMP的水平。结果 VNP可显著增加脂联素mRNA水平和蛋白表达，同时提高细胞内cGMP的水平（38±5~265±35 pmol/mL）；该效应可用8-Br-cGMP（可透过膜的cGMP类似物）诱导，但可被cGMP依赖性蛋白激酶抑制剂KT-5823或钠尿肽受体NPR阻断剂HS-142-1抑制。结论 VNP可通过NPR/cGMP/PKG信号通路增加脂肪细胞脂联素的表达。

高效制备人诱导多能干细胞并诱导分化为心肌细胞

方月琴 郭娟宁 孙晓明 侯一平 顾准

2012, 32(9):  1030-1035. 

摘要 ( 1145 )   PDF (1651KB) ( 769 )  

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摘要：目的 提高人诱导性多能干细胞（human induced pluripotent stem cells, hiPSC）转化效率，缩短其产生周期，并避免引入外源基因。方法 利用GP2-293细胞包装Oct4，Sox2，Klf4和c-myc四种因子的逆转录病毒，对人成纤维上皮细胞（human fibroblast feeder cells, HFF）进行感染，在转化过程中加入SB431542，PD0325901和thiazovivin物质，待形态与胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESC)相似的克隆出现并长至足够大，进行独立培养，检测其标记蛋白，定向诱导分化能力和核型分析。结果 HFF经四种因子转化之后，在20天时出现形态与ESC克隆相似的hiPSC，比Yamanaka方法时间缩短了10天，效率提高约12倍。它们与ESC同样表达标记蛋白质Oct4，SSEA3，Tra-1-60和Tra-1-81；体外成功定向分化为心肌细胞。核型分析表明所获得hiPSC的染色体核型正常。结论 本课题所建立的hiPSC生成体系转化效率高、所需周期短，并成功诱导分化成具有节律性搏动的心肌细胞，为心血管疾病模型的建立和研究提供了实验基础。

CYP4A11基因多态性与心肌梗死相关

阿布来提.艾白都拉 付真彦 杨红 谢翔 郑颖颖 朱晴

2012, 32(9):  1036-1039. 

摘要 ( 1254 )   PDF (356KB) ( 719 )  

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目的：研究在不同性别中CYP4A11基因多态性与心肌梗死的关系。 方法：166例心肌梗死患者和158例对照组，选择CYPA11基因的3个SNPs (rs9332978, rs3890011, rs1126742)，应用TaqMan SNP基因分型法进行基因分型，并应用病例对照的研究方法进行相关性分析。 结果： rs3890011的基因分型在心肌梗死组和对照组之间的分布存在明显差异（P＜0.05），心肌梗死组携带GG基因型（GG vs CC+GC）高于对照组（P＜0.05），在排除吸烟、高血压、糖尿病等混杂因素后，仍存在显著性差异 (95%CI: 1.138-2.432，P＜0.01)。 结论：CYP4A11基因的rs3890011多态性与心肌梗死相关，rs3890011的GG基因型可作为心肌梗死易感基因标记。

血管紧张素转化酶基因I/D多态性与脑梗死后抑郁相关

杜明艳 丁文军 封靖 杜会山

2012, 32(9):  1040-1043. 

摘要 ( 1197 )   PDF (460KB) ( 690 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的 探讨北京地区汉族人群血管紧张素转化酶（ACE）基因插入/缺失（I/D）多态性与脑梗塞后抑郁（PCID）发病的关系。方法 用汉密尔顿抑郁量表评定664例脑梗塞患者抑郁状态，用PCR方法检测患者ACE基因I/D多态性，分析基因多态性分布与脑梗塞后抑郁发病的相关性。结果 脑梗塞后抑郁患者组ACE基因的I/I基因型频率和I等位基因频率（分别为0.388和0.549）显著高于脑梗塞后非抑郁患者对照组（C）（分别为0.286和0.481，P<0.05）。结论 ACE基因I/D多态性与脑梗塞后抑郁发病相关，ACE I/I基因型可能是脑梗塞后抑郁发病的危险因素。

慢性神经病理性疼痛对大鼠脊髓背角miRNA表达的影响

李敏娜 申乐 黄宇光

2012, 32(9):  1044-1048. 

摘要 ( 1077 )   PDF (600KB) ( 681 )  

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摘要：目的 筛选慢性神经病理性疼痛大鼠脊髓背角差异表达的miRNA，并预测其调控的靶基因。方法 建立大鼠坐骨神经慢性压迫损伤CCI模型，在术后疼痛高峰期取腰膨大脊髓背角，用miRNA芯片筛选CCI大鼠差异表达的miRNAs，再用荧光实时定量RT-PCR验证差异表达的miRNAs，并利用MIRANDA、TARGETSCAN、PICTAR三个数据库找出这些miRNA可能调控的靶基因。结果 CCI大鼠表达上调的有miR-99b，表达下调的有miR-674-3p、miR-879与miR-325-5p。RT-qPCR验证结果与芯片基本相符。预测这些miRNA可能的靶基因约26个，这些基因功能广泛。结论 慢性神经病理性疼痛可导致miRNA的表达发生变化，这些miRNA及其调控的靶基因为进一步研究奠定了基础。

重组腺病毒Ad-HGF-hIL10基因治疗大鼠肝纤维化

邱红 邢继成 朱月蓉 王冰

2012, 32(9):  1049-1052. 

摘要 ( 1262 )   PDF (776KB) ( 688 )  

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摘要：目的 探讨人IL-10和HGF双表达的重组腺病毒hIL10-HGF对大鼠肝纤维化的治疗效果，以期为肝纤维化的的基因治疗提供实验基础。方法 建立SD大鼠肝纤维化模型后，将1.5×108PFU的Ad-HGF、Ad-hIL10和Ad-HGF-hIL10经尾静脉注射入大鼠体内，对照组和正常组注射同剂量的生理盐水。第15天心脏采血，检测血清的肝功能指标，并取肝组织做HE染色，观察各组大鼠肝脏的病理形态。结果：与对照组大鼠相比，治疗组大鼠的肝组织损伤程度减轻，汇管区看不到明显的纤维增生。各治疗组的肝功能指标与对照组相比， TBIL、ALT、AST明显降低，ALB显著升高，肝功能得到了明显的改善，而Ad-HGF-hIL10双基因治疗组与Ad-HGF、Ad-hIL-10单基因治疗组相比，ALT、AST显著降低(P<0.01)，白球比与其它两个单基因治疗组相比显著上升(P<0.01)。结论 用双基因的腺病毒载体治疗肝纤维化大鼠，肝功能的改善效果明显优于单基因治疗组。表明HGF 和hIL-10在大鼠肝纤维化的改善过程中发挥了协同作用，本实验为肝硬化的基因治疗提供了一定的实验基础。

TWEAK和Fn14在腰椎间盘退变髓核组织中的表达及意义

陈春永 沈正清 叶君健

2012, 32(9):  1053-1058. 

摘要 ( 1274 )   PDF (815KB) ( 649 )  

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摘要：目的研究TWEAK和Fn14在腰椎间盘退变髓核组织中的表达及其临床意义。方法用半定量RT-PCR和免疫组织化学法检测实验组（30例退变腰椎间盘）和对照组（10例创伤腰椎间盘）中TWEAK和Fn14 mRNA和蛋白表达。结果实验组TWEAK mRNA表达显著高于对照组（0.949士0.093 VS 0.653士0.110，P＜0.01)，实验组TWEAK蛋白表达显著高于对照组（0.682士0.126 VS 0.397士0.057，P＜0.01)，实验组Fn14mRNA表达显著高于对照组(0.936士0.125 VS 0.632士0.059,P＜0.01)，Fn14蛋白表达显著高于对照组(0.540士0.051 VS 0.344士0.072,P＜0.01)。结论TWEAK和Fn14的表达增加可能参与腰椎间盘退变的进程。

筋脉通含药血清降低高糖培养大鼠雪旺细胞活性氧水平及PARP-1蛋白表达

石玥 梁晓春 张宏 王普艳 赵丽

2012, 32(9):  1059-1063. 

摘要 ( 1335 )   PDF (622KB) ( 680 )  

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目的 研究筋脉通含药血清对体外高糖培养雪旺细胞活性氧(ROS)水平及多聚（ADP-核糖）聚合酶-1（PARP-1）蛋白表达的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组,分别灌胃筋脉通(JMT)、维生素C(VC)或蒸馏水制备含药血清和对照血清。取新出生大鼠的双侧坐骨神经用于制备雪旺细胞，分为高糖组、JMT组(加入筋脉通含药血清)、VC组(加入维生素C含药血清)及正常对照组。培养48h后, 采用激光扫描共聚焦显微技术检测细胞内二氯荧光黄(DCF)的荧光强度而测得细胞内ROS水平；采用免疫印迹法（Western blot）的方法检测细胞PARP-1（89ku）的蛋白表达。结果 1）高糖组雪旺细胞ROS-DCF荧光值（86.59±8.14）显著高于正常值（P＜0.01）；筋脉通含药血清组（44.58±8.67）与维生素C含药血清组（46.12±8.80）均显著低于高糖组（P＜0.01）。2）与正常组比较，高糖组雪旺细胞内PARP-1（89ku）含量（0.712±0.012）明显增加（P＜0.01）；与高糖组比较，筋脉通含药血清组含量（0.307±0.025）明显降低（P＜0.01），且明显优于维生素C组（0.594±0.017）（P＜0.01）结论 筋脉通含药血清能显著减少ROS生成，降低PARP-1的活性和酶解，减轻细胞DNA氧化损伤。

大肠癌ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达及微血管形成的相关性

杨炼 王娅兰 盛永涛 熊薇 徐剑侠 唐怡 李娴

2012, 32(9):  1064-1069. 

摘要 ( 1223 )   PDF (1337KB) ( 660 )  

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目的 探讨大肠癌组织中单ADP核糖基转移酶ART1的表达与VEGF、整合素αVβ3表达的相关性及其对大肠癌组织微血管生成的影响。方法 免疫组化检测大肠癌组织中ART1、VEGF及整合素αVβ3的表达；免疫荧光双标检测ART1/VEGF及ART1/整合素αVβ3的共表达，用Chalkley分析法评估微血管的形成。结果 ART1、VEGF与整合素αVβ3的表达高于对照组(P

氯普鲁卡因诱导体外人宫颈癌细胞抑癌基因CDH1、APC和P16启动子去甲基化及基因表达

宋银宏 何苗 符策岗 龙春燕 汪磊 王想 吴林蓉

2012, 32(9):  1070-1075. 

摘要 ( 1235 )   PDF (769KB) ( 630 )  

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摘要：目的 观察氯普鲁卡因(CP)对人宫颈癌细胞HeLa和CaSki的抑癌基因CDH1、APC及P16启动子甲基化水平和基因表达的影响。方法 用不同终浓度的CP（0、1、1.5、2、3和4 mmol/L）处理癌细胞系HeLa和CaSki及正常人脐静脉内皮细胞HUVEC，MTT法检测细胞生长抑制率；用甲基化特异性PCR (MSP) 和RT-PCR检测1.5 mmol/L CP处理后各细胞CDH1、APC及P16启动子甲基化状态及基因表达水平。结果 1.5 mmol/L CP作用96 h后，HeLa和CaSki抑制率分别为 (66.17±5.82) % 和 (69.12±6.89) %，显著高于HUVEC的 (21.78±3.12) %， 1.5 mmol/L CP处理宫颈癌细胞96 h后，CDH1、APC及P16基因启动子均有不同程度去甲基化，3种基因mRNA均增强或者恢复了表达。结论 CP可以抑制人宫颈癌细胞HeLa和CaSki增殖，诱导HeLa和CaSki的CDH1、APC及P16基因启动子去甲基化，并可增加或者恢复相应基因的表达。

钨酸钠促进新生猪胰岛细胞体外增殖、分化及分泌功能　

刘书苑 陈科 刘敏 何红晖 谢艳红 谢晓云 莫朝晖

2012, 32(9):  1076-1081. 

摘要 ( 1014 )   PDF (828KB) ( 812 )  

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摘要：目的　观察钨酸钠在体外对新生猪胰岛细胞增殖及功能活性的影响。方法　分离和纯化新生猪胰岛细胞后，与钨酸钠共育，隔天进行细胞计数、MTT试验，取最佳浓度300μmol/L钨酸钠与细胞共同培养3天，收集细胞进行葡萄糖刺激试验，并分别用Western blot、 RT-PCR方法检测细胞内胰岛素蛋白(INSULIN)、细胞增殖核抗原（PCNA）和PDX-1 mRNA、GLUT-2 mRNA的表达。 结果300μmol/L钨酸钠处理后胰岛细胞增殖活性及葡萄糖刺激试验中胰岛素分泌明显高于对照组（P < 0. 05），钨酸钠干预组PCNA蛋白（1.17±0.13 vs 2.24±0.19，P < 0. 05）、INSULIN（0.37±0.08 vs1.62±0.17，P < 0. 01）较对照对照组明显增高，PDX-1（0.11±0.03 vs0.34±0.05，P < 0. 01）、GLUT-2（0.13±0.02 vs 1.06±0.10，P < 0. 01）基因的 mRNA表达明显上调。 结论　低浓度（300μmol/L）钨酸钠具有促进新生猪胰岛细胞增殖分化、增强胰岛细胞功能、促进胰岛素分泌的作用

解除狭窄联合Rho激酶抑制剂对颈动脉狭窄大鼠认知功能的影响

冉昌丽 李耀彩

2012, 32(9):  1082-1087. 

摘要 ( 1265 )   PDF (1789KB) ( 9411 )  

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目的 观察解除颈动脉狭窄联合Rho激酶抑制剂对重度颈动脉狭窄所致大鼠VCI模型认知功能、海马区细胞凋亡情况及相关基因表达的干预作用。方法 取SD大鼠60只，制作重度颈动脉狭窄模型，将其随机分成5组：联合组、药物组、狭窄解除组、对照组和假手术组。联合组给予狭窄解除和法舒地尔（8.35mg/kg），药物组注射等量的法舒地尔，狭窄解除组给予解除狭窄，对照组注射等容积的生理盐水。分别在干预2和4周后，Morris 水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力；免疫组化方法分析海马区凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax免疫阳性细胞数的变化；TUNEL染色法检测海马区神经细胞的凋亡。结果：与单纯药物组和狭窄解除组比较，联合治疗组大鼠的逃避潜伏期和游泳距离百分比均有显著改善(P<0.05)，海马区凋亡相关蛋白Bcl-2免疫阳性细胞数显著增加（P<0.05），而Bax的免疫阳性细胞数显著降低(P<0.05)，且治疗4周比2周更明显（P<0.05）；联合治疗组大鼠海马区的神经细胞凋亡率有显著下降(P<0.05)，且随着治疗时间延长，细胞凋亡率呈下降趋势。结论：解除颈动脉狭窄联合Rho激酶抑制剂可通过调节凋亡相关蛋白的表达从而明显改善颈动脉狭窄引起的认知功能障碍。

福辛普利抑制LPS诱导的人肾小管上皮HK-2细胞TAK1表达

黄文辉 卢守燕 汤羽

2012, 32(9):  1088-1092. 

摘要 ( 1035 )   PDF (596KB) ( 586 )  

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摘要：目的 探讨福辛普利（FOS）对脂多糖（LPS）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖及对转化生长因子β激活激酶（TAK1）表达的影响。方法 体外培养正常HK-2细胞，分为3组：对照组（Ctrl）、LPS诱导组（10μg/L）、FOS干预组（LPS 10 μg/L+ FOS 1×106 mol/L）。细胞培养12、24和48h，以甲基噻唑基四唑（MTT）法检测细胞增殖情况，酶联免疫吸附（ELISA）法观察细胞上清纤维粘连蛋白（FN）变化，Western-blotting法检测TAK1、FN蛋白表达，实时荧光定量PCR检测TAK1 mRNA的含量。结果 LPS诱导组较对照组细胞的增殖水平[在48小时分别为(0.462±0.013)及( 0.363±0.014) ]、细胞胞浆中FN的含量均显著增高，且自12h开始TAK1蛋白[在48小时分别为(1.627±0.101)及(0.547±0.010) ]及mRNA表达水平上调（P<0.01，P<0.05），FOS干预组细胞增殖[在48小时为(0.396±0.011)]、FN的含量及TAK1的表达[在48小时蛋白表达为(1.308±0.097)]较同时间点LPS组[在48小时蛋白表达为(1.627±0.101)]显著下调（P<0.01）。结论 FOS可能通过抑制HK-2的增生与活化，减轻细胞外基质FN的沉积，起到延缓肾间质纤维化的作用。

研究短文

罗格列酮对2型糖尿病大鼠血清ox-LDL、ET、NO的干预作用

胡丽叶 宋光耀 朱旅云 李晓玲

2012, 32(9):  1093-1094. 

摘要 ( 1074 )   PDF (317KB) ( 613 )  

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目的：制备2型糖尿病的动物模型，分析血清ox-LDL水平变化与ET、NO改变的关系，并了解罗格列酮的干预作用。方法：雄性Wistar大鼠80只，随机分为对照组、高脂组、糖尿病组、罗格列酮治疗组各20只，制备2型糖尿病大鼠模型，成模后罗格列酮治疗组予罗格列酮灌胃治疗，先后于灌胃治疗6周和12周时处死部分动物取血进行血糖、血脂、胰岛素、氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）的检测，比较各组间指标变化及各组自身前后的指标变化。结果：1 糖尿病成模后6周和12周，与对照组相比，罗格列酮治疗组、糖尿病组血糖、血脂、空腹胰岛素水平升高，p<0.05。罗格列酮治疗组12周时胰岛素水平较6周时下降，p<0.01。2 糖尿病成模后6周时：与对照组比较，高脂组、糖尿病组和罗格列酮治疗组ox-LDL升高，p<0.05。糖尿病成模后12周时：糖尿病组ox-LDL较对照组升高，p<0.01。高脂组12周时ox-LOX较6周时升高，p<0.01。3 糖尿病成模后6周和12周时，与对照组比较，高脂组、糖尿病组及罗格列酮治疗组ET升高，p<0.01。12周时糖尿病组较高脂组和罗格列酮治疗组ET升高，p<0.05。4 糖尿病成模后6周和12周时，与对照组比较，高脂组、糖尿病组及罗格列酮治疗组NO降低，p<0.01。12周时与高脂组和罗格列酮治疗组比较，糖尿病组NO降低，p<0.05。糖尿病组自身NO水平在12周时与6周时比较下降，p<0.05。结论：1 糖尿病组大鼠较高脂饮食组大鼠表现出更明显的糖脂代谢紊乱，且随时间延长程度加重。2 无论是糖尿病组还是高脂饮食组大鼠致动脉硬化因子ox-LDL、ET升高，预防动脉硬化的保护因子NO下降，并随时间延长有加重趋势。3 罗格列酮可一定程度改善T2DM大鼠的脂代谢紊乱、IR，降低AS致病因子ox-LDL、ET，改善NO/ET失衡。

短篇综述

Tim-3及其配体Galectin-9与病毒感染的关系

赵慧 王亮 马秀敏 丁剑冰

2012, 32(9):  1095-1098. 

摘要 ( 1168 )   PDF (430KB) ( 691 )  

相关文章 | 计量指标

摘要: T细胞免疫球蛋白粘蛋白3 ( Tim-3) 基因是Tim家族成员, 与其配体半乳凝素-9（Galectin-9）结合可显著抑制T细胞的活化和增殖,并调节细胞因子的表达和分泌。Tim-3/Galectin-9参与免疫反应的调节及抗病毒免疫反应，阻断此通路可促进CD8+T细胞应答和对病毒的控制。因此，Tim-3/Galectin-9通路可能与病毒感染慢性化有关。此文就Tim-3及其配体的生物学特性、功能及在病毒感染中的研究近况进行综述。

瘦素抵抗的免疫调节作用及其与肿瘤发生的关系

程欢欢 王华阳 曲迅

2012, 32(9):  1099-1102. 

摘要 ( 1384 )   PDF (381KB) ( 569 )  

相关文章 | 计量指标

瘦素是一种内分泌激素，与受体结合后发挥调节食欲、能量代谢、生殖和造血等多种生物学作用。瘦素抵抗与肿瘤发生发展密切相关，除对肿瘤细胞的增殖及凋亡等发挥作用外，还参与调节肿瘤局部微环境中多种免疫细胞的数目与功能，通过调控抗肿瘤免疫活性参与肿瘤发生发展。目前已发现瘦素抵抗的免疫调节作用在多种类型肿瘤中发挥功能，对肿瘤的诊断与防治具有重要意义。

白色念珠菌感染免疫应答的研究进展

黄玉淑 白丽

2012, 32(9):  1103-1106. 

摘要 ( 1009 )   PDF (420KB) ( 844 )  

相关文章 | 计量指标

白色念珠菌的致病是其与机体免疫系统相互作用的结果。研究发现，白色念珠菌感染人体时，刺激机体产生固有免疫及特异性细胞免疫和体液免疫应答。其中特异性细胞免疫占主导地位。了解认识白色念珠菌感染的免疫应答对诊断、预防及治疗白色念珠菌感染具有重要意义。

ATP结合盒转运体A1基因变异与冠心病的研究进展

彭洁 郭媛

2012, 32(9):  1107-1110. 

摘要 ( 1442 )   PDF (363KB) ( 674 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

摘要：脂质代谢异常是冠心病的发病机制之一，ATP结合盒转运子A1（ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1）在胆固醇的逆向转运（reverse cholesterol transport, RLT）及高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）生成中起重要作用。ABCA1基因变异可引起脂质代谢紊乱，促进动脉粥样硬化及冠心病的发生发展。本文就近年来对ABCA1基因变异与冠心病关联性及其参与冠心病发病机制方面的研究做一简述。

体外细胞组织重建中共培养技术的应用

谭美华 陈建苏

2012, 32(9):  1111-1114. 

摘要 ( 1267 )   PDF (431KB) ( 731 )  

相关文章 | 计量指标

摘要：如何模拟体内环境进行体外细胞组织重建是干细胞研究和组织工程研究领域一直关心的研究课题。细胞共培养体系可以通过直接接触或非直接接触二维共培养、三维细胞共培养及条件培养基等多种方式获得，尤其是多孔膜两侧直接接触共培养和三维细胞共培养可以显著增加干细胞分化的可塑性，目前越来越受到重视。此共培养体系在维持细胞基本结构和性状的基础上，通过两种或多种细胞组织的相互作用，使体外环境与体内环境尽可能相吻合，弥补了单层细胞培养的缺陷，有利于构建更加接近生理状态的重建体外细胞组织，被广泛应用于现代细胞研究，成为角膜、牙周、软骨、心血管以及神经细胞组织等体外构建的重要技术应用。