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当期目录

    2011年 第31卷 第7期    刊出日期:2011-07-05
    研究论文
    高渗诱导人气道上皮细胞株黏液高分泌
    涂静 尤列.皮尔曼 维克多.科罗索夫 周向东
    2011, 31(7):  723-727. 
    摘要 ( 1698 )   PDF (581KB) ( 756 )  
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    目的 研究高渗条件对正常人气道上皮细胞(HBE)黏蛋白(MUC)5AC分泌的影响,以及蛋白激酶C(PKC)-热休克蛋白(HSP)70信号途径在其中的可能作用。方法 采用高渗盐水诱导培养HBE16细胞的方法复制黏液高分泌体外模型,分别用PKCμ抑制剂G?6976,PKCα抑制剂Safingol,PKCβ抑制剂LY333531和PKCδ抑制剂Rottlerin干预HBE16细胞。Western blot检测HSP70-2的蛋白含量;RT-PCR检测人HSP70-2转录水平;ELISA检测培养上清MUC5AC蛋白含量。结果 各高渗组的培养上清MUC5AC蛋白含量、HSP70-2蛋白和转录水平较对照组显著升高,并随着培养时间的延长而逐渐增加(p均 < 0.05)。G?6976处理组的上述指标显著降低(p < 0.01),但仍高于对照组(p < 0.05);而Safingol、LY333531和Rottlerin处理组均无改变。结论 高渗盐水可诱导人气道上皮细胞MUC5AC的高分泌,HSP70-2系通过PKC中的μ亚型在该过程中起重要作用的。
    头颈肿瘤浸润gdT细胞的数量及表型与临床分期相关
    殷珊珊 陈兴明 康宁 陈晓巍 高志强 何维
    2011, 31(7):  728-735. 
    摘要 ( 1994 )   PDF (884KB) ( 576 )  
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    目的 研究头颈肿瘤中浸润的Foxp3+gdT细胞的数量与头颈肿瘤临床分期的关系。方法 用组织研磨法分离患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs),用密度梯度离心法分离患者外周血单个核细胞(PBMCs);用固相化anti-pan-TCRgd单克隆抗体对TIL和PBMC进行2~4周的体外扩增,免疫荧光染色和流式细胞仪测定扩增前后的细胞;对头颈肿瘤组织芯片进行免疫组织化学染色。结果 15例头颈肿瘤组织标本TIL中gdT占CD3+T细胞的0.37%~12.35%,其中0.13%~34.38%为Foxp3+ gdT。扩增后TIL中gdT占CD3+T细胞的20.38%~82.87%,且以Vd1亚型为主。肿瘤组织芯片按照肿瘤TNM分期中的T分期分为4组,Foxp3+gdT细胞的比例随肿瘤分期的提高而增加。结论 现有证据证明了头颈肿瘤组织中存在Foxp3+ gdT细胞的浸润,并提示肿瘤组织中调节表型gdT细胞的数量可能与头颈肿瘤的预后相关。
    细胞毒T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与吸毒并HIV感染相关
    刘莹 刁波 申元英 周芳 冯勇 罗凡 侯炜
    2011, 31(7):  736-739. 
    摘要 ( 1418 )   PDF (373KB) ( 633 )  
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    目的 研究细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因外显子1的49位点A/G和启动子-318位点C/T多态性与吸毒并HIV感染的相关性。方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR-SSP)方法,检测24例单纯吸毒者、41例吸毒合并HIV感染患者以及204例正常对照者CTLA-4基因外显子1的49位点A/G和启动子-318位点C/T的基因型。结果 与正常对照组比较,吸毒组C/C(12.50% VS 51.47%)(P<0.01)型频率明显下降;在吸毒合并HIV感染患者组,CTLA-4 A+49G基因型差异无统计学意义(P>0.05);CTLA-4 C-318T基因型差异有统计学意义(P<0.01),C/T(68.3% VS 45.6%) 、T/T(21.95% VS 2.94%)型频率明显上升,C/C(9.76% VS 51.47%)型频率显著下降。与吸毒组比较,吸毒合并HIV感染组中CTLA-4 A+49G及CTLA-4 C-318T各基因型频率变化无统计学差异(p>0.05)。结论 吸毒合并HIV感染与CTLA-4基因动态密切相关,C-318T基因型C/T、T/T型与吸毒合并HIV感染呈正相关,C/C行呈负相关。
    小鼠Islet-1基因慢病毒表达载体的构建及其诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞特异性分化
    智深深 田杰 刘官信 鲁荣 林建萍 刘建平 朱静
    2011, 31(7):  740-745. 
    摘要 ( 1688 )   PDF (863KB) ( 634 )  
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    目的 研究Islet-1对干细胞分化的影响。方法 用PCR钓取目的基因,将目的基因与pLenO-WPI载体连接,选取阳性质粒,与辅助质粒共同感染293T细胞生产出慢病毒载体。感染C3H10T1/2细胞,实时荧光定量PCR及Western blot检测Islet-1和心肌、肝脏、骨骼及神经各系统相关标志物的表达,免疫荧光检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达部位。结果 PCR及测序显示目的片段正确插入,实验组有Islet-1表达;心肌早期发育相关基因GATA-4、MEF2C、NKx2.5在检测到荧光蛋白1周后升高,2周到达高峰,3周后可检测到心肌特异性蛋白cTnT(0.582±0.0576),其时序性表达呈随时间增强趋势; cTnT表达于胞质;肝脏系统特异性标志AFP及ALB、骨骼系统特异性标志BGP及BALP、神经系统特异性标志Nestin及GFAP均未表达。结论Islet-1具有特异性促进干细胞向心肌样细胞分化的作用。
    约氏疟原虫MIF分子调节巨噬细胞炎性因子基因表达
    邵丁丁 曾山 钟翔 王恒
    2011, 31(7):  746-750. 
    摘要 ( 1555 )   PDF (472KB) ( 650 )  
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    目的 分析约氏疟原虫表达的巨噬细胞迁移抑制因子(MIF) 对小鼠巨噬细胞炎性因子基因表达的调节情况,并比较PyMIF和宿主小鼠MIF (MmMIF) 在调节炎性因子表达水平方面的差异。方法 亲和柱纯化原核表达的带His 标签的重组MIF 蛋白, 去除内毒素后刺激体外培养的同步化小鼠单核巨噬细胞系, 随后纯化高质量的RNA , 通过小鼠炎性因子和受体芯片进行分析。结果 PyMIF显著促进(ΔΔCt≥2)了17个炎性因子和炎性因子受体基因的转录,同时显著降低(ΔΔCt≤ -2)了3个基因(CCR6、CCR8和IL1F6)的转录水平。并且,PyMIF调节的基因数量明显多于MmMIF。结论 PyMIF和MmMIF对巨噬细胞的活性调节存在显著差异,此结果为进一步了解PyMIF对宿主炎性反应的作用提供了重要数据。
    MUC1靶向性载药纳米粒的构建及其体外抗肿瘤效应的评估
    于琛琛 胡燕 段金虹 王琛 许海燕 杨先达
    2011, 31(7):  751-755. 
    摘要 ( 2028 )   PDF (560KB) ( 576 )  
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    目的 构建MUC1靶向纳米粒,并在体外评估其抗肿瘤效应。方法 采用聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)制备包载紫杉醇的纳米粒,并在表面偶联具有MUC1蛋白靶向性的核酸适配体。紫外分光光度法、动态光散射法测定MUC1靶向载药纳米粒的基本表征;以MUC1过表达的乳腺癌细胞MCF-7为实验组,肝癌细胞HepG2为对照组,用流式细胞仪检验纳米粒的选择性,MTS法评估其杀伤效果和IC50。 结果 MUC1靶向载药纳米粒粒径(225.3 ± 9.2)nm,药物包封率83.6% ± 1.7%,在体外可以特异性地被MUC1+癌细胞摄入,对MCF-7细胞杀伤作用显著强于普通载药纳米粒(P < 0.01),IC50 为1.52 mg/L。 结论 该靶向纳米粒可以在体外特异性地增加MUC1+肿瘤细胞对纳米粒的摄入,降低IC50值,提高抗化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效率。
    黑龙江省3 866名健康儿童静脉血细胞参数参考范围调查
    杜娟 吴卫 邱玲 徐涛 黄大伟 辛丽亚 陈倩 程歆琦 王庚 韩少梅 朱广瑾
    2011, 31(7):  756-761. 
    摘要 ( 1609 )   PDF (609KB) ( 652 )  
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    目的 调查分析黑龙江省健康儿童静脉全血细胞8个参数的水平,建立各参数的儿童参考范围。方法 随机抽取黑龙江省部分地区8~16岁健康儿童3 866人(男性1 837人,女性2 029人),采集受试者清晨空腹静脉血,用Sysmex XT-1800i 全血细胞分析仪进行检测。采用SPSS 15.0软件分析比较各参数在民族、地区及年龄间的差异。结果 黑龙江省健康儿童静脉血细胞参数均值(参考范围)中白细胞计数为6.9(3.9~9.9)×109/L,红细胞计数男性为5.0 (4.2~5.8)×1012/L,女性为4.6(4.0~5.2)×1012/L,血红蛋白浓度男性为146(124~168)g/L,女性为135(117~153)g/L,血细胞比容男性为43.9%(37.5%~50.5%),女性为41.2%(36.4%~46.0%),红细胞平均体积为88 (80~96)fl,红细胞平均血红蛋白含量为29(25~33)pg,红细胞平均血红蛋白浓度为329(311~347)g/L,血小板计数为277(161~393)×109/L。汉族、朝鲜族健康儿童的WBC、HGB、MCH、MCHC及PLT 5项参数存在显著差异( P<0.05);黑龙江省各地区间血细胞各参数均存在不同程度差异(P<0.05)。年龄组间比较,除WBC外,余各参数在不同年龄组间均存在不同程度的差异(P<0.05),其中RBC、HGB、HCT、MCV及MCH与年龄呈正相关,MCHC、PLT与年龄呈负相关。结论 初步建立了黑龙江省健康儿童静脉血细胞分析参数的参考范围,发现了汉族与朝鲜族以及黑龙江不同地区间儿童静脉血细胞分析参数的差异。
    miR-16促进Neuro2a细胞的凋亡
    刘畅 刘伟 王明 阴彬 袁建刚
    2011, 31(7):  762-766. 
    摘要 ( 1752 )   PDF (1372KB) ( 659 )  
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    目的 检测过表达miR-16对小鼠Neuro2a细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-16在肿瘤发病过程中的可能机制。方法 构建能够在细胞中过表达miR-16的真核表达载体pcDNA3.1-miR-16,利用Real-time PCR验证了表达载体的过表达效应。应用pcDNA3.1-miR-16载体转染Neuro2a细胞,利用流式细胞术和TUNEL法检测Neuro2a细胞周期及凋亡改变情况。 结果 转染过表达pcDNA3.1-miR-16载体后,成熟的miR-16表达与对照组相比明显升高(P<0.05)。在Neuro2a细胞中过表达miR-16后,用流式细胞术检测发现,Neuro2a细胞周期未见明显改变,与对照组相比,凋亡细胞数量有显著增加;进一步通过TUNEL法验证,发现miR-16的过表达能够促进Neuro2a的细胞凋亡。结论 过表达miR-16能够显著促进Neuro2a细胞凋亡而对细胞周期并无影响,提示miR-16可能对肿瘤治疗起到作用。
    姜黄素通过下调IκBα磷酸化抑制食管鳞癌细胞的体外增殖
    田芳 柴玉荣 江亚南 张晓艳
    2011, 31(7):  767-772. 
    摘要 ( 1693 )   PDF (862KB) ( 640 )  
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    目的 探讨姜黄素是否能够通过下调IκBα的磷酸化,抑制食管鳞癌细胞的增殖并对其细胞周期产生影响。方法 MTT法检测姜黄素作用下食管鳞癌细胞的增殖;Western blot法检测EC9706和Eca109细胞在姜黄素作用下pIκBα和细胞周期蛋白cyclinD1的表达情况。两种细胞中加入姜黄素培养72h,或联合5-FU培养72h,流式细胞仪检测细胞周期。结果 EC9706和Eca109细胞的存活率均随着姜黄素浓度的增加逐渐下降;姜黄素作用下EC9706和Eca109细胞中pIκBα和cyclinD1蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐下降,且G0/G1期的细胞开始增加,S期的细胞逐渐减少;当姜黄素联合使用5-FU时,G0/G1期的细胞明显增加, S期的细胞明显减少。结论 姜黄素通过下调IκBα及cyclinD1的表达,抑制食管鳞癌细胞的增殖,或许有望成为食管癌治疗中的一个辅助用药。
    MTHFR基因C677T多态性与冠心病患者血浆同型半胱氨酸和叶酸水平相关
    胡小平 刘春莲 武玲 戴晓婧 彭亮 焦海燕 陈银涛
    2011, 31(7):  773-776. 
    摘要 ( 4113 )   PDF (388KB) ( 990 )  
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    目的 研究宁夏地区汉族人群5,10- 亚甲基四氢叶酸还原酶基因( MTHFR ) C677T多态性、同型半胱氨酸水平(Hcy)及叶酸水平与冠心病(CHD)的相关性。方法 用病例-对照研究方法,限制性片段长度多态性扩增技术(PCR-RFLP )分析宁夏地区汉族202例冠心病患者及199例正常人群MTHFR C677T基因型频率及基因频率的分布特点。荧光偏振免疫分析法测定血浆Hcy水平,化学发光免疫分析法测定血清叶酸、VitB12浓度。 结果 (1) 病例组与对照组MTHFR C677T基因型频率分别为 CC型 23.3% vs 20.7% 、CT型 52.3% vs 54.5% 和 TT型 24.4% vs 24.8%,两组间基因型及基因分布无差异。(2) 冠心病患者组中MTHFR基因C677T CC基因型患者血浆Hcy浓度(10.84 μmol/L) 较T基因型携带者(12.24 μmol/L ) 低(P<0.01)。CC基因型患者血浆叶酸浓度(5.38 μg/L) 较T基因型携带者(3.72 μg/L)高 (P<0.05)。结论 MTHFR C677T的3种基因型在宁夏汉族冠心病患者和正常人群中的分布无统计学意义。MTHFR基因C677T多态性与冠心病的危险因素Hcy水平,叶酸水平相关。
    2型糖尿病骨质疏松大鼠骨重建减慢
    王燕 李宝新 刘岩 李玉坤
    2011, 31(7):  777-782. 
    摘要 ( 1698 )   PDF (912KB) ( 643 )  
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    目的 通过建立2型糖尿病骨质疏松大鼠模型,探讨其骨重建特点。方法 雌性Wistar大鼠分为假手术组(NS组);去卵巢组(NOVX组);2型糖尿病假手术组(DS组)和2型糖尿病去卵巢组(DOVX组)。糖尿病组大鼠造模成功后行双侧卵巢切除术,0、4、8和12周测血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、雌激素(E2)及血清骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP5b),同期测定骨密度(BMD)并行成骨和破骨细胞培养。结果 0周时DOVX组的血糖13.1±4.9mmol/L明显高于NS组的4.4±0.6mmol/L(均P<0.05)。4周时DOVX组的BMD为0.073±0.012g/cm2明显低于NS组的0.098±0.016g/cm2(P<0.05)。4、8和12周时DOVX组的B-ALP与NS组均无差异,而4和8周时DOVX组的TRACP5b明显高于NS组(均P<0.05)。4、8和12周时DOVX组的成骨细胞活力与NS组均无差异,而DOVX组的破骨细胞计数明显高于NS组(均P<0.05)。结论 2型糖尿病骨质疏松大鼠骨重建特点为骨吸收活跃而骨形成相对减慢。
    自体Retronectin诱导的CIK细胞治疗晚期结肠癌的疗效观察
    徐本玲 高全立 袁龙 范瑞华 张成娟 宋永平
    2011, 31(7):  783-787. 
    摘要 ( 1682 )   PDF (524KB) ( 710 )  
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    目的 探讨Retronectin诱导的CIK治疗晚期结肠癌安全性及有效性。方法分离患者单个核细胞用Retronectin、CD3单抗、IFN-γ和IL-2等细胞因子诱导产生CIK细胞。患者每周回输1次CIK细胞,连续4次。采用流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞免疫表型,应用BDTM-HumanCBATh1/Th2型细胞因子试剂盒监测治疗前及回输后7天外周血细胞因子变化。结果 每个患者平均回输细胞数为23.9×109/L(20.6×109~27.2×109),不良反应小。CIK细胞输注后,患者外周血中淋巴细胞数、CD3+、CD3+CD56+和CD3+CD8+细胞数均有明显升高(P<0.05)。12例患者中有1例获部分缓解(PR),4例稳定,其中PR和2例SD患者的CEA水平有明显下降(P<0.05)。治疗后临床获益患者的血清中IFN-γ(6.9 vs. 53.2 pg/mL) 和 TNF-a (3.2 vs. 24.6 pg/mL)明显升高(P<0.05)。结论 自体Retronectin诱导的CIK细胞通过增加效应细胞数明显增强免疫功能而无不良反应,是一种安全有效的过继免疫治疗,对恶性肿瘤的传统治疗策略有一定的借鉴作用。
    人脂肪组织来源的神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤
    刘斌 董静 刘宁 王瑞敏 张晋霞 李世英 陈贵良
    2011, 31(7):  788-792. 
    摘要 ( 2066 )   PDF (984KB) ( 690 )  
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    目的 探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的疗效。 方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2h再灌注模型。体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(2×106 cells /mL)。用MNSS量表测定神经功能,TTC、HE染色观察脑梗死体积及脑组织病理变化。结果 移植治疗组再灌注14、21和28天的神经功能评分低于缺血再灌组(p<0.05,或p<0.01)。移植治疗组第14d脑梗死体积(40.20±9.52mm3)小于缺血对照组(66.60±14.24mm3)(P<0.01)。移植治疗组的神经细胞变性、坏死数量较缺血再灌组明显减少。结论 人脂肪组织来源的神经干细胞移植治疗可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,具有神经保护作用。
    应用于双向电泳技术的不同软骨蛋白提取方案对比
    肖军 尹若峰 梁锦前 史占军 吴志宏 邱贵兴
    2011, 31(7):  793-798. 
    摘要 ( 1980 )   PDF (777KB) ( 541 )  
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    目的 探索可兼顾双向电泳凝胶图像质量和结果保真性的软骨蛋白提取方案。方法 取股骨髁软骨(n=17)。分别用软骨组织直接提取总蛋白(软骨组织组)、软骨组织提取总蛋白后CPC处理(软骨+CPC组)、直接分离软骨细胞提取总蛋白(直接软骨细胞组)或培养软骨细胞提取总蛋白(培养软骨细胞组)同步进行2-DE,对比不同方案产生凝胶图像质量和结果保真性的差异。 结果 软骨组织组不能形成等电聚焦。软骨+CPC组可形成等电聚焦,但蛋白点数量偏少。直接软骨细胞组可获得与培养软骨细胞组媲美的高质量等电聚焦和凝胶图像,且在高分子量和偏碱区域分离出培养软骨细胞组缺如的部分蛋白点,质谱结果显示这些蛋白分别为VI型胶原、TGF-β2和annexin等骨关节炎病因学相关蛋白。结论 从软骨组织直接提取软骨细胞用于2-DE的方案在解决等电聚焦难题的同时,还避免了细胞培养对实验结果保真性的影响,是软骨相关疾病样本的2-DE研究优化处理方案。
    丙戊酸钠对Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤细胞周期的影响
    田霞 刘鹏 王丽红 张志华 赵蕾 郝长来
    2011, 31(7):  799-803. 
    摘要 ( 1655 )   PDF (1120KB) ( 664 )  
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    目的 观察丙戊酸钠(VPA)对急性髓性白血病(AML)Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤组织细胞周期的影响。方法 建立Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤模型,分为对照组和VPA治疗组,观察裸鼠移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。用流式细胞仪检测细胞周期,用免疫组化及Western blot检测P21WAF1/CIP和RB蛋白磷酸化(pRB)水平。结果 1.VPA体内用药明显抑制裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤的生长,瘤体积及重量明显小于对照组,肿瘤抑制率(IR%)为57.25%。2.细胞周期阻滞于Go/G1期。3.P21WAF1/CIP蛋白表达水平(0.900±0.113)显著高于对照组(0.390±0.001)、pRB蛋白表达水平(0.340±0.620)显著低于对照组(0.810±0.420)。结论 VPA可通过对Kasumi-l细胞周期蛋白及周期蛋白依赖性激酶抑制剂的影响,使细胞阻滞于Go/G1期。
    异丙酚减轻大鼠脑缺血再灌注损伤
    钟守琳 陈会平 朱志良 周静 王同祥
    2011, 31(7):  804-808. 
    摘要 ( 1509 )   PDF (695KB) ( 566 )  
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    目的 探讨异丙酚对脑缺血再灌注损伤的作用及其可能的机制,为临床用药提供实验依据。方法 将大鼠随机均分为假手术组、异丙酚预处理组、大脑缺血-再灌注组。用Longa法成功制备,左侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,于再灌注24h后,取大脑切片行2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色,测量并计算脑梗死容积百分比。流式细胞仪检测大鼠脑缺血-再灌注后神经元的凋亡率、坏死率。用Western bolt检测大脑皮质和海马组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶(caspase-3)、凋亡抑制基因(survivn)蛋白表达量。结果 大鼠局灶性脑缺血-再灌注后大脑皮质和海马区出现神经细胞的坏死和凋亡改变,与假手术组相比HIF-1α、caspase-3蛋白表达增加,分别为HIF-1α 0.84±0.03、caspase-3 0.57±0.04、假手术组分别为0.46±0.02、0.17±0.01(P<0.05)、survivn蛋白表达减少0.19±0.02,假手术组为0.31±0.01(P<0.05);给予异丙酚预处理后上述变化显著减轻,HIF-1α 0.68±0.02、caspase-3 0.29±0.03、survivn 0.52±0.02(P<0.05)。结论 异丙酚可能通过抑制大脑缺氧,抑制神经元的凋亡,从而对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤发挥保护作用。
    Elafin在人支气管上皮细胞系16HBE胞质内对黏蛋白5AC生成的影响
    魏华生 尤列.皮尔曼 维克多.科罗索夫 周向东
    2011, 31(7):  809-813. 
    摘要 ( 1322 )   PDF (1048KB) ( 581 )  
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    目的 探讨Elafin在胞质内对表皮生长因子(EGF)诱导的黏蛋白(MUC)5AC生成的影响及其作用机制。方法 体外培养人支气管上皮细胞系16HBE,将已构建好的pEGFP-N1-Elafin载体通过LipofectamineTM2000转染到16HBE细胞中,以转染空质粒载体的16HBE细胞作为对照,均给予外源性EGF作为刺激物共同孵育。以RT-PCR和ELISA分别检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC mRNA水平和MUC5AC含量。间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜检测细胞核中核因子(NF)-κB的活性。免疫共沉淀法结合Western blot检测SUMO-1-p-IκBα含量。结果 转染重组质粒的细胞中MUC5AC mRNA水平、MUC5AC的含量(0.36±0.09)以及NF-κB的活性显著低于转染空载体的对照组细胞(MUC5AC的含量0.55±0.07)(P﹤0.01),而SUMO-1-p-IκBα的含量则显著高于后者(P﹤0.01)。结论 Elafin能够通过促进p-IκBα的类泛素化阻止NF-κB的活化,从而下调MUC5AC的生成。
    自噬增强结肠癌CD133+细胞对5-FU的化疗抵抗
    司晓丽, 刘伟, 杨爱军, 王晨昱, 李敏
    2011, 31(7):  814-819. 
    摘要 ( 3205 )   PDF (893KB) ( 658 )  
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    目的 对5-FU诱导结肠癌CD133+细胞发生自噬的过程进行观察,初步探讨自噬对化疗的影响。 方法 用MTT法检测细胞增殖抑制率及IC50;用免疫磁珠分选CD133+细胞;用透射电子显微镜(TEM)观察细胞的超微结构,用MDC染色,荧光显微镜观察自噬囊泡;联合应用细胞活性实验、集落形成实验研究自噬对化疗的影响。结果 不同浓度5-FU处理后,人结肠癌SW480细胞活性明显受到抑制,其半数抑制浓度IC50为(1.09±0.18)μg/mL。CD133+胞质出现大量的自噬体及自噬囊泡; 相比较单独给予5-FU,联合给予5-FU及3-MA,CD133+细胞活性由(81.8±4.6)%下降到(56.3±5.5)%(P<0.05), 集落形成率由(81.1±3.4)%下降(64.4±4.8)%(P<0.05)。结论 5-FU可诱导结肠癌CD133+细胞发生自噬;自噬的抑制能够增强5-FU对结肠癌CD133+细胞的细胞毒效应。
    构建海人酸诱导的内侧颞叶癫痫小鼠模型
    何婷婷 张丹 幸小亮 沙龙泽 金丽日 沈岩 吴立文 许琪
    2011, 31(7):  820-826. 
    摘要 ( 1783 )   PDF (1769KB) ( 601 )  
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    目的 建立C57BL/6颞叶癫痫小鼠模型,观察其在行为学和病理学上的变化。 方法 将C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、生理盐水注射组(35 μL/g)和海人酸注射组(12 mg/kg),进行单侧海马注射。注射5 d或5周后,取小鼠脑进行HE染色,观察海马病理结构改变;检测海马组织中mTOR通路标志物P-S6蛋白质表达量的改变。结果(1)海人酸注射小鼠发生面部抽搐、双侧前肢痉挛等急性期癫痫持续发作和慢性期自发发作;(2)海马注射侧CA1、CA3神经元明显丢失,慢性期小鼠模型出现中齿状回颗粒细胞散布,符合海马硬化特征性病理改变;(3)小鼠海马组织中P-S6蛋白质的表达量在急性期(P < 0.05)和慢性期(P < 0.01)均上调。结论 单侧海马注射海人酸可成功建立C57BL/6小鼠内侧颞叶癫痫模型,可观察到与内侧颞叶癫痫临床表现类似的行为学、组织病理学上的改变。
    HPV检测在“不典型鳞状细胞-不除外宫颈高度上皮内病变”中的意义
    张小燕 卞美璐 陈庆云
    2011, 31(7):  827-830. 
    摘要 ( 2217 )   PDF (540KB) ( 560 )  
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    目的 探讨高危型人乳头状瘤病毒(HR – HPV )检测对细胞病理学诊断为不典型鳞状细胞-不除外宫颈高度上皮内病变的 (ASC-H)患者的临床处理价值。方法 2004年6月~2007年4月于中日友好医院妇产科门诊进行宫颈细胞学检查的患者17 125例,选择其中细胞学诊断结果为不典型鳞状细胞的患者,应用第二代杂交捕获方法检测HR-HPV,观察HR-HPV检测对细胞学诊断结果为ASC-H进行分流的意义。结果 HR-HPV阳性的 ASC-H患者中宫颈高度病变的检出率(48.1%)显著高于ASC-US (25.2%),(P <0.01)。13例HR-HPV阴性的ASC-H患者中1例宫颈活组织检查结果为CIN2(Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)(5.9%),与ASC-US(5.7%)相比无差异。在ASC- US和ASC-H患者中,HR-HPV检测对于宫颈高度病变的敏感性分别为82.8%、96.2% ,阴性预告值分别为94.3%,92.3%。结论 对于HR-HPV阴性的ASC-H患者可以考虑定期随诊细胞学和高危型HPV,减少阴道镜检查,HR-HPV检测可能对于ASC-H患者同样具有分流作用。
    临床园地
    异位胰腺32例临床诊治分析
    古应超 于健春
    2011, 31(7):  831-833. 
    摘要 ( 1335 )   PDF (285KB) ( 656 )  
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    目的 总结探讨异位胰腺的临床特点及诊治方式。方法 回顾分析北京协和医院1992年~2010年经病理证实的32例异位胰腺患者的临床特点及诊治情况。 结果 32例异位胰腺分布于胃(15例)、十二指肠(4例)、空肠(9例)和回肠(4例),其中26例为近4年检出。除8例术前获确诊外,6例误诊为胃肠间质瘤,5例误诊为平滑肌瘤,1例误诊为胃溃疡恶变;其余12例为其他腹部手术中发现。1例行胃镜活检证实,31例行手术切除后经术后病理确诊;所有患者无明显并发症发生。结论 胃肠道黏膜下隆起病变应考虑异位胰腺可能,确诊后可选择内镜摘除或手术切除。
    Churg-Strauss综合征肾脏损害的临床特征
    高碧霞 李明喜 文煜冰 李雪梅 李学旺
    2011, 31(7):  834-838. 
    摘要 ( 1938 )   PDF (931KB) ( 558 )  
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    目的 探讨中国人Churg-Strauss综合征(CSS)肾脏损害的临床特点,以提高对此类疾病的认识。方法 回顾性分析北京协和医院近10年来CSS确诊病例肾脏损害的临床特点和治疗转归。结果 40例临床资料完整CSS病例的平均发病年龄为(43.6±18.1)岁。抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)阳性9例(22.5%),其中抗髓过氧化物酶(MPO)抗体6例(15%)。CSS肾脏损害13例(32.5%),6例(46.2%)表现为单纯尿检异常,7例(53.8%)肾功能异常即估算的肾小球滤过率(eGFR)<60mL/min/1.73m2。肾脏损害组ANCA阳性率(46.2%)明显高于非肾脏损害组(14.8%)(P<0.05)。经足量糖皮质激素联合CTX治疗1个月后,12例存活患者eGFR(102.0±35.3mL/min/1.73m2)较治疗前eGFR(73.5±36.5 mL/min/1.73m2)显著升高 (P<0.05),其中5例肾功能异常患者eGFR均恢复正常;所有患者蛋白尿和血尿明显好转。结论 CSS肾脏损害并不少见,其临床表现相对较轻,对足量糖皮质激素联合CTX治疗效果较好。CSS肾脏损害可能和ANCA尤其是抗MPO抗体相关。
    短篇综述
    蛋白质组学技术在宫颈癌研究中的应用进展
    栾力 程玉峰
    2011, 31(7):  839-842. 
    摘要 ( 1727 )   PDF (426KB) ( 599 )  
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    蛋白质组学技术已广泛应用于肿瘤的发生机制、肿瘤特异性标志物的筛选和鉴定、疗效评价等方面的研究,也应用于宫颈癌的早期诊断、临床分期、筛选治疗靶点等方面的探索,从蛋白质组水平揭示了宫颈癌蛋白质表达谱的变化,为宫颈癌诊断和治疗的发展提供了可靠的理论依据。
    荧光原位杂交技术在泌尿系统非尿路上皮肿瘤的研究进展
    董德鑫 李汉忠
    2011, 31(7):  843-846. 
    摘要 ( 1375 )   PDF (407KB) ( 581 )  
    相关文章 | 计量指标
    作为一种新技术,荧光原位杂交技术在泌尿系统非尿路上皮肿瘤中得到广泛应用并取得了一些成果:肾上腺肿瘤的良恶性鉴别;肾肿瘤的病理分型,转移预后;肾母细胞瘤的发病机理;VHL综合症的基因诊断;前列腺癌的发病机理和治疗预后;睾丸癌等其他肿瘤的基因诊断等。