当期目录

2008年 第28卷 第12期    刊出日期：2008-12-25

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研究论文

肝细胞癌患者肝组织中JAB1和P27kip1的表达变化及其临床意义

王酉 陆牡丹 李鹏 崔小鹏 沈爱国

2008, 28(12):  1233-1238. 

摘要 ( 2644 )  

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目的 研究肝细胞癌（HCC）组织中c-Jun激活域连接蛋白1（c-Jun activation domain binding protein 1，JAB1）的表达及与P27kip1(P27)间的关系，探讨JAB1与临床病理及预后的关系。方法 免疫组化检测HCC及 相应癌旁肝组织中JAB1和P27的表达。Western blot及免疫沉淀检测JAB1和P27的表达及相互作用。结果 HCC中，JAB1的表达高于癌旁肝组织，P27表达低于癌旁组织。JAB1的表达与组织分化程度、AFP值及转移相关（P<0.05）。HCC中JAB1与P27的表达呈负相关(r=－0.7077, P<0.001)，并且能免疫共沉淀。结论 JAB1的表达与P27负相关，JAB1作为P27的负性调控因子，可能与HCC的恶性进展及预后相关。

低氧促进兔骨髓间充质干细胞增殖

须珏华 周燕 谭文松

2008, 28(12):  1239-1242. 

摘要 ( 1719 )  

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目的 观察低氧/常氧间传代培养对兔骨髓间充质干细胞（rMSCs）增殖的影响。方法 将在5%O2下扩增的细胞接种后，或继续在5%O2下培养，记为L-L，或在20%O2下培养，记为L-N；对20%O2下扩增的细胞作同样的处理，分别记为N-N和N-L。取各组细胞进行生长曲线、集落形成率、葡萄糖乳酸代谢和胞内ROS的测定。结果 L-L组的细胞数和集落形成率最高，N-N组最低，而胞内ROS的水平则与此相反。低氧下培养的MSCs葡萄糖比消耗速率和乳酸比生成速率较高，乳酸对葡萄糖的得率大于2.0mmol/mmol。结论 持续低氧传代培养促进rMSCs的增殖；低氧对MSCs增殖的影响与胞内ROS的表达密切相关。

人膀胱癌EJ细胞EZH2基因表达降低后基因表达谱的差异分析

张一兵 牛海涛 畅继武

2008, 28(12):  1243-1247. 

摘要 ( 368 )  

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目的 利用基因芯片技术筛选膀胱癌EJ细胞EZH2基因RNA干扰后的差异表达基因，探讨EZH2基因在肿瘤中作用机制。方法 构建EZH2基因的shRNA表达载体，转染膀胱癌EJ细胞，基因芯片筛选差异表达基因并上传passway miner服务器（http:// www. biorag. org. /passway. htm）进行功能分类。结果 差异表达基因436条，下调179条，上调257条，功能聚类分析显示115个差异表达基因定位于已知的生物通路中，有EGF信号传导通路、p53传导通路、细胞增殖、细胞周期通路、Notch、Wnt 通路等。EZH2靶基因WNT1、MYT1、CNR1、WT1表达上调，部分通路及基因与肿瘤干细胞和细胞分化有关。结论 EZH2基因通过多个基因介导参与细胞分化，对EZH2相关基因的研究有助于明确EZH2在细胞癌变过程中的作用机制

Anchor Attachment蛋白在结直肠癌中表达增强

左富义 李世拥 于波（北京） 安萍 杨梅

2008, 28(12):  1248-1250. 

摘要 ( 251 )  

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目的 探讨Anchor Attachment蛋白（AAP）的表达与结直肠癌浸润、转移的关系及临床意义。方法 免疫组织化学法检测AAP的表达，分析AAP表达水平与肿瘤临床病理特征之间的关系；并用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中AAP表达水平。结果 结直肠正常肠黏膜、癌原发灶、淋巴结和肝转移灶中AAP的表达阳性率分别为20.5%、53.0%、69.8%和80.0%；癌原发灶、转移淋巴结和肝转移灶中AAP表达阳性率均显著高于正常肠黏膜组织（P＜0.01），转移淋巴结和肝转移灶中AAP阳性率高于癌原发灶（P＜0.05）；淋巴结转移患者和肝转移患者的原发灶AAP阳性率显著高于无转移者（P＜0.01）；Dukes分期A、B、C、D期患者AAP阳性率逐渐增高，各分期之间差异显著（P＜0.01）。83例结直肠癌患者血清AAP水平为(6.3±2.8)μg/L，显著高于30例健康志愿者的(2.2±0.9)μg/L，（t＝6.976，P＜0.01）；Dukes分期A、B期患者血清AAP水平为(5.2±2.6)μg/L，显著低于C、D期患者的(7.1±2.9)μg/L（P＜0.05）。结论 检测外周静脉血AAP水平对预测和判断结直肠癌病情和肝转移有重要意义。

CYP2J3基因经静脉转染大鼠的组织分布

常静 芦玲巧 王红霞 王晶 马立权 郑少鹏 张立克

2008, 28(12):  1251-1254. 

摘要 ( 305 )  

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目的 观察CYP2J3基因转染后大鼠心、肝、肺、肾及胸主动脉CYP2J3基因表达和11，12-EET的含量。方法 经大鼠阴茎背静脉快速注射质粒复制大鼠转基因模型。将36只雄性 Wistar 大鼠（280~300g）随机分为空白对照组、pcDNA3.1质粒和pcDNA3.1- CYP2J3重组质粒注射组，分别于14和28d取材。用半定量RT-PCR法检测CYP2J3 mRNA表达，高效液相色谱法测定11，12-EET含量。结果 pcDNA3.1-CYP2J3重组质粒组28d时各组织CYP2J3基因表达强于对照组和pcDNA3.1质粒组；各组织11，12－EET 含量增高。（P < 0.05）结论 以pcDNA3.1质粒作为非病毒性载体，可增强目的基因CYP2J3在心、肺、肝、肾及胸主动脉的表达。

拟老年痴呆大鼠脑中GFAP和NSE蛋白表达的改变

朱莹莹 倪道凤 许彩民

2008, 28(12):  1255-1259. 

摘要 ( 386 )  

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目的 了解老年痴呆模型大鼠海马及嗅球中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）表达的差异，从而了解嗅觉与老年痴呆的关系。方法 成年SD大鼠，通过向大鼠侧脑室内注射Aβ建立模型后用免疫组化方法检测海马及嗅球中GFAP和NSE的表达，并对嗅球中两者蛋白水平表达的变化进行初步的检测。结果 通过比较模型组与对照组海马及嗅球组织，模型组GFAP的表达显著增加，而NSE的表达则降低。结论 老年痴呆大鼠模型组与对照组嗅觉系统内GFAP和NSE蛋白表达存在显著性差异。

JAK2抑制剂AG490对食管癌细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响

刘俊茹 左连富 杨建柱 王莹 刘淑霞 王冬

2008, 28(12):  1260-1265. 

摘要 ( 334 )  

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目的 研究食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡及COX-2表达与信号转导子和激活子3（STAT3）信号传导通路的关系，明确以JAK2/STAT3为靶向的信号转导在Eca-109细胞中的分子调控机制。方法 将JAK2抑制剂AG490作用于Eca-109细胞，用MTT法检测细胞增殖；流式细胞仪、DNA琼脂糖电泳法及透射电子显微镜检测细胞凋亡；Western blot法检测细胞中JAK2、p-JAK2、p-Stat3及COX-2的蛋白表达变化；RT-PCR 检测COX-2 mRNA的变化。结果 AG490呈时间、剂量依赖性的抑制Eca-109细胞增殖并诱导凋亡，抑制JAK2/STAT3通路蛋白的表达，呈浓度依赖性地下调p-JAK2及p-Stat3蛋白的表达（P <0.05），并下调COX-2 mRNA及蛋白的表达（P <0.05）。结论 JAK2/STAT3信号传导通路调控AG490对Eca-109细胞作用的细胞内信号传导机制，最终通过下调COX-2表达影响Eca-109细胞的增殖并诱导凋亡。

BPI23-haFGF融合蛋白的鉴定及其生物活性研究

马艳 朱家勇 金小宝 刘雷山 王艳 李娟兰

2008, 28(12):  1266-1270. 

摘要 ( 342 )  

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目的：研究BPI23-haFGF融合蛋白的生物学活性。方法：将已构建的酵母重组表达菌株pPICZαA-BPI23-haFGF/X-33进行甲醇诱导表达，通过亲和层析纯化和冻干浓缩后，观察融合蛋白BPI23-haFGF对细菌、NIH3T3细胞以及小鼠烫伤模型的作用。结果：获得纯度约90%的融合蛋白BPI23-haFGF，BPI23-haFGF具有杀菌及促增殖的双重功能，BPI23-haFGF促增殖率与HaFGF标准品相当，当其浓度为0.40 g/L时，促NIH3T3细胞增殖率最高（88.7 %）；在小鼠烫伤模型中，用药组比阴性对照组提前2～3d 愈合。结论：融合蛋白BPI23-haFGF能够改善小鼠烫伤创面的愈合，为其在临床上的应用奠定了基础。

人外周血单个核细胞来源内皮祖细胞的生物学性状

张菲斐 韩战营 杨海波 邱春光 黄振文 李凌 张晓

2008, 28(12):  1271-1276. 

摘要 ( 312 )  

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目的 探讨从成人外周血单个核细胞中分离、培养内皮祖细胞（EPCs）的方法以及EPCs的生物学特征。方法 密度梯度离心法获得单个核细胞（MNCs），种植于纤连蛋白包被的培养板中。每2h去除1次未黏附细胞共2次，然后隔日换液1次，7d后计数早期集落。每例血样均分为2等份，1份在获得早期集落后进行实验；另1份持续培养至晚期集落出现进行相同实验。流式细胞技术检测细胞表面抗原表达，ELISA法测定上清液中血管内皮生长因子（VEGF）浓度。胶原凝胶细胞种植实验测定体外血管生成功能。结果 早期集落中心为圆形细胞，周边是放射状排列的纺锤形细胞，再种植不能形成第二代集落且无体外血管形成功能，细胞表面主要表达CD14和CD45，培养上清液中可测到高浓度的VEGF。晚期集落在培养21至28d间出现，再种植可形成第二代内皮细胞集落，并能在胶原凝胶中形成管腔样结构。其构成细胞与早期集落相比CD45、CD14表达显著减少（P<0.001）而CD146表达明显增加（P<0.01）。结论 人外周血单个核细胞在内皮培养条件下可形成早期和晚期集落，构成早期集落的绝大多数细胞属于单核细胞系列，可分泌VEGF但不能分化成内皮细胞，晚期集落具有内皮祖细胞的形态和生物学特征。

STAT3在溃疡性结肠炎患者肠黏膜的表达及活化增强

牛宏垚 张晓岚 王娜 李娜 宋光辉 蒋树林 姜慧卿

2008, 28(12):  1277-1282. 

摘要 ( 377 )  

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目的 检测溃疡性结肠炎（UC）患者结肠黏膜STAT3、pSTAT3蛋白及STAT3 mRNA的表达及与UC疾病活动度的关系。方法 47例UC患者根据内镜及临床活动度进行分级，收集正常对照结肠黏膜标本13例；用免疫组织化学法检测STAT3、pSTAT3在结肠黏膜的定位；用Western blot及RT-PCR法检测STAT3、pSTAT3蛋白及STAT3 mRNA在结肠黏膜的表达。结果 ⑴ STAT3为胞质着色；pSTAT3主要为胞核着色，胞质中也有表达，二者均主要表达于大量浸润的单个核细胞，且二者在UC患者黏膜的阳性细胞数及染色强度均有随病变的加重逐渐增加的趋势；⑵UC患者肠黏膜STAT3、pSTAT3蛋白的表达量高于对照者，且随着病变分级逐渐增加。⑶UC患者肠黏膜STAT3 mRNA的表达与蛋白表达一致。结论 UC患者结肠黏膜中STAT及pSTAT3的表达随病变程度逐渐增加，在一定程度上可以反映疾病的活动度。

海马theta振荡参与迷走神经刺激术抗癫痫作用

董献文 胡祁生

2008, 28(12):  1283-1287. 

摘要 ( 354 )  

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目的 观察弱电刺激迷走神经中枢端对正常及痫样放电大鼠海马CA1区细胞放电及场电的影响。方法 SD雄性大鼠55只（150～250g）, SPF级。分对照组45只和青霉素致规则痫样放电组10只。第一组分离其颈部左侧迷走神经，结扎外周端，弱电（10Hz,0.5ms,1.5～5.0V,15～20个/串）刺激迷走神经，每5min刺激1次，共20次。记录右侧海马CA1细胞放电及双侧海马CA1场电。第二组是在第一组的方法中用浸有青霉素钠溶液的明胶海绵（400u～600u∕mm3）置于左侧皮层诱发痫样放电，待稳定30min后进行实验。结果 第一组大鼠双侧场电出现3～6.5Hz 的周期性theta电振荡（38/45，84.4%），伴有theta-on (n=30) 和theta-off（n=5）两种形式细胞放电。第二组大鼠痫样放电尖波电压幅度降低，尖波间隔延长(n=10)。痫样放电尖波间隔出现theta振荡，伴细胞紧张性放电(n=10)。细胞放电的动作电位个数与痫样放电尖波间隔呈正相关(p<0.001 )，与痫样放电尖波电压降无相关性。结论 海马theta振荡可能参与迷走神经刺激术抗癫痫作用，海马 theta-on细胞可能参与抑制癫痫发生频率。

依拉普利增加糖尿病大鼠海马组织内突触素的表达

高原 肖谦

2008, 28(12):  1288-1291. 

摘要 ( 276 )  

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目的 观察依拉普利对糖尿病大鼠空间学习和记忆能力，以及海马组织内突触素表达的影响。方法 随机将40只大鼠分为对照组、糖尿病组、糖尿病+依拉普利组。建立STZ糖尿病大鼠模型，依拉普利干预12周，Morris水迷宫测试大鼠的空间学习和记忆能力，并用免疫组化和RT-PCR技术分别检测大鼠海马组织内突触素的蛋白和mRNA表达。结果 与糖尿病组比较，依拉普利组大鼠在Morris水迷宫测试中逃避潜伏期明显缩短（P<0.05），中心区停留时间百分比和通过原平台位置次数显著增加（P<0.05），大鼠海马组织内突触素蛋白和mRNA表达水平明显增加(P<0.05)。结论 依拉普利改善糖尿病大鼠空间学习和记忆的能力可能与海马组织内突触素表达增加有关。

ERK1和P16在人胃肠道间质瘤组织中的表达及相关性

俞薇薇 瞿伟 熊小亮 刘繁荣 袁晟

2008, 28(12):  1292-1295. 

摘要 ( 285 )  

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目的 检测ERK1和P16 在胃肠道间质瘤组和正常对照组中的表达，探讨其在胃肠道间质瘤(GIST)发生和发展中的作用和相互关系。方法 采用组织芯片技术和免疫组化Elivision二步法检测40例胃肠道间质瘤组和40例正常对照组中ERK1和P16的表达，应用图像分析软件Image-Pro Plus 6.0对ERK1和p16的表达行平均吸光度分析。结果 与正常组织相比，胃肠道间质瘤组织中ERK1的表达明显增高（ P＜0.01），而P16的表达明显降低（P＜0.01）。ERK1和P16的表达与组织学分级密切相关（P＜0.05），而与年龄、肿块大小、组织学类型和复发无相关性。胃肠道间质瘤中ERK1与P16的表达呈负相关（P＜0.05）。结论 在胃肠道间质瘤组织中，ERK1明显增高，P16则明显降低。两者之间存在显著负相关。

血小板反应蛋白1反义寡核苷酸抑制TGF-β1诱导大鼠心肌纤维化

陈玲 胡建新 程晓曙 苏海 洪葵 李菊香 吴延庆

2008, 28(12):  1297-1299. 

摘要 ( 358 )  

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目的 观察血小板反应蛋白1（TSP-1）反义寡核苷酸在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠心肌成纤维细胞中的作用。方法 差速贴壁法分离新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs)。反义、正义、TSP-1寡核苷酸与TGF-β1(20?g/L)共培养24h ,采用MTT法测CFs生长数目,羟脯氨酸法测胶原含量,RT-PCR 法测TSP-1和VEGF的mRNA表达。结果TGF-β1可以明显促进CFsTSP-1mRNA的表达且呈浓度-时间依赖性(P<0.01)。VEGFmRNA的表达呈浓度-时间依赖性降低(P<0.01)。TSP-1反义寡核苷酸作用后的MTT A 值、胶原蛋白含量减少，VEGF的表达明显增高(P<0.01)。结论TSP-1反义寡核苷酸可抑制TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖、胶原合成和升高VEGF的表达。TSP-1反义寡核苷酸可能具有抗心肌纤维化的作用。

7925例遗传咨询者细胞遗传学分析

景晓红 李俊华 秦翠云 剡宏民 强荣 郑军

2008, 28(12):  1300-1302. 

摘要 ( 289 )  

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目的 通过7925例遗传咨询者的染色体检查和分析，说明染色体异常对流产、智力低下、原发闭经等的影响。方法 对待检者进行外周血培养、染色体G显带分析。 结果 共检出染色体异常核型221例，异常率2.78%。其中常染色体异常172例，占2.17%；性染色体异常49例，占0.62%；经有关专家鉴定有13种核型为世界首报。 结论 染色体异常是引起自然流产、畸胎、智力低下、女性原发闭经的重要原因。

技术与方法

小鼠胎肝间充质干细胞的分离及鉴定

孙艳 张洹

2008, 28(12):  1303-1307. 

摘要 ( 267 )  

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目的 分离培养小鼠胎肝间充质干细胞（flMSCs）。方法 改良贴壁法分离BABL/c胎鼠肝脏间充质干细胞，测定生长曲线检测增殖能力；流式细胞术分析细胞周期和表型；体外诱导贴壁细胞向脂肪、软骨、骨组织分化并鉴定。结果 贴壁法分离的flMSCs呈均一梭形，细胞倍增时间约为24 h。83.76%±2.88% 的flMSCs处于G0/G1期，表达间质系列表面标志CD44, CD29, 不表达造血细胞表面标志CD45, CD11b; 诱导后能向脂肪、软骨、骨组织方向分化。结论 贴壁法可以分离flMSCs, 传代有助其纯化；flMSCs具有强增殖能力和分化潜能，是理想的干细胞治疗来源。

临床园地

丙泊酚和咪唑安定镇静对拔管时程的影响

白颖 周宁

2008, 28(12):  1308-1310. 

摘要 ( 298 )  

相关文章 | 计量指标

目的 探讨丙泊酚和咪唑安定镇静对机械通气拔管时程的影响。方法 患者随机分为丙泊酚镇静组（37人）和咪唑安定镇静组（52人）。再将患者分为三层，即短程镇静（预计＜24h）、中程镇静（预计≥24h但＜72h）和长程镇静（＞72h）。两种药物在准备脱机时立即停用，观察并比较患者停用两种药物后的苏醒时间及拔管时间。结果 丙泊酚镇静组患者的苏醒时间及拔管时间均早于咪唑安定镇静组患者（P＜0.05）。结论 在对机械通气患者进行不同时程的镇静后，丙泊酚在缩短患者的拔管时程上优于咪唑安定。

研究短文

阿司匹林对高脂血症小型猪炎症因子的影响

黄广勇 谢忠忱 黄丽洁 苟鹏 刘亚干 李春海 陈华

2008, 28(12):  1311-1312. 

摘要 ( 233 )  

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PDGF-D在儿童IgA肾病中的表达增加

戎赞华 齐钊 史永红 段惠军

2008, 28(12):  1313-1314. 

摘要 ( 256 )  

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缬沙坦对大鼠肾间质纤维化的影响

万美燕 崔永军 邹作君

2008, 28(12):  1315-1316. 

摘要 ( 307 )  

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缺血预处理对大鼠肝移植早期的保护作用

侯建存 李玉民 强喆 何明彦

2008, 28(12):  1317-1318. 

摘要 ( 238 )  

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缓解-复发型多发性硬化患者血脑屏障损害及sICAM-1、TNF-α水平的临床分析

王军 吕洁

2008, 28(12):  1319-1320. 

摘要 ( 231 )  

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短篇综述

RNA干扰的体内应用研究进展

安君艳 张晓岚

2008, 28(12):  1321-1323. 

摘要 ( 375 )  

相关文章 | 计量指标

RNA干扰是由双链RNA引发的序列特异性基因沉默现象，目前已成为体外实验中抑制基因表达的首选方法。在体内实验中，近年也已经发表了上百篇将siRNA运用于哺乳动物的研究，说明RNA干扰同样可成为体内实验的强有力工具，并有望成为一种有效的疾病治疗手段。本文就RNA干扰体内实验中的影响因素、实验设计及近年研究进展等进行综述。

高糖对体外培养雪旺细胞影响的研究进展

屈岭 梁晓春 张宏

2008, 28(12):  1324-1328. 

摘要 ( 317 )  

相关文章 | 计量指标

雪旺细胞在糖尿病周围神经病变过程中起着重要的作用，近年来伴随组织细胞体外培养技术的日趋成熟，探讨体外高糖环境对雪旺细胞的影响逐渐成为研究新热点。本文就近年来高糖环境对体外培养雪旺细胞影响的相关研究作一综述。

雷帕霉素在免疫抑制和肿瘤抑制中的双重作

米蕊芳 张宏冰

2008, 28(12):  1329-1331. 

摘要 ( 337 )  

相关文章 | 计量指标

雷帕霉素（rapamycin）是近年来应用较多的免疫抑制剂，它在肿瘤治疗中也发挥重要作用。雷帕霉素（rapamycin）与FKBP12结合，形成Rapamycin- FKBP12复合物，这一复合物抑制mTOR (mammalian target of rapamycin)的活性，进一步抑制mTOR下游的一系列分子的合成或功能。雷帕霉素可将免疫细胞滞留于G1期，阻止免疫细胞的增殖；抑制IL-2和其他的免疫分子的合成,从而发挥其免疫抑制作用。另一方面，对于肿瘤细胞，雷帕霉素抑制其生长和增殖，发挥肿瘤抑制作用。它的这一双重功能可应用在器官移植和肿瘤治疗的交叉领域。

TLR4及内源性配体对缺血-再灌注损伤的作用

陈雪峰 何桂珍 董良广

2008, 28(12):  1332-1335. 

摘要 ( 307 )  

相关文章 | 计量指标

Toll样受体4(TLR4)在内源性配体参与下介导缺血再灌注损伤,两者的结合对组织损伤和固有免疫应答起重要作用。肝、肾、肺、脑等发生缺血再灌注损伤早期，细胞释放各种内源性配体，被TLR4 识别并结合。Toll样受体4与内源性配体(如HMGB1)的结合可能是缺血再灌注损伤中最主要的炎症应答的触发器，并引起一系列导致炎症和免疫应答的级联反应。阻断两者的结合可能对各种缺血-再灌注损伤引起的炎症反应和细胞损伤有保护作用。

雷帕霉素抗神经退行性病研究进展

杨光 祝元刚 杨慧

2008, 28(12):  1336-1338. 

摘要 ( 463 )  

相关文章 | 计量指标

雷帕霉素作为一种传统的抗真菌药物，具有免疫抑制剂和抗肿瘤的作用。值得注意的是，它通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶标蛋白mTOR、受体FKBP、VMP1，促进自噬，抑制了帕金森病、亨廷顿病等神经退行性变的病理过程，从而有望成为一种新的抗神经退行病药物。本文对其新的研究进展予以综述。